| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 中英文缩略词 | 第15-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-38页 |
| 1.1 糖代谢概述 | 第18-19页 |
| 1.2 昆虫重要的糖类 | 第19页 |
| 1.3 海藻糖简介 | 第19-23页 |
| 1.3.1 海藻糖代谢 | 第20-21页 |
| 1.3.2 昆虫海藻糖的功能 | 第21-23页 |
| 1.4 几丁质简介 | 第23-33页 |
| 1.4.1 几丁质合成 | 第24-26页 |
| 1.4.2 几丁质的沉积与降解 | 第26-28页 |
| 1.4.3 几丁质的功能 | 第28-33页 |
| 1.5 昆虫激素对糖代谢的调控 | 第33-35页 |
| 1.5.1 蜕皮激素诱导糖代谢基因的转录 | 第34页 |
| 1.5.2 保幼激素对糖代谢基因转录水平的调控 | 第34-35页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第35-38页 |
| 第二章 马铃薯甲虫糖类和脂类代谢基因的克隆及其对激素信号的响应 | 第38-84页 |
| 2.1 材料与方法 | 第39-49页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第39页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.3 基因全长的获得 | 第40-46页 |
| 2.1.4 dsRNA合成 | 第46页 |
| 2.1.5 生物测定 | 第46-47页 |
| 2.1.6 中肠孵育 | 第47页 |
| 2.1.7 20E与JH的定量分析 | 第47页 |
| 2.1.8 实时荧光定量PCR | 第47-48页 |
| 2.1.9 统计分析 | 第48-49页 |
| 2.2 结果与分析 | 第49-79页 |
| 2.2.1 糖代谢基因的克隆 | 第49-64页 |
| 2.2.2 糖代谢基因的龄期表达 | 第64-66页 |
| 2.2.3 昆虫激素调控海藻糖代谢基因的转录 | 第66-72页 |
| 2.2.4 昆虫激素对LdUAP和LdChS转录水平的影响 | 第72-79页 |
| 2.3 讨论 | 第79-84页 |
| 2.3.1 马铃薯甲虫糖类和脂类代谢基因的克隆 | 第79-80页 |
| 2.3.2 马铃薯甲虫幼虫20E和JH调控LdUAP的转录水平 | 第80页 |
| 2.3.3 昆虫激素通过海藻糖代谢和几丁质合成关键基因的转录调控昆虫的生命进程 | 第80-84页 |
| 第三章 海藻糖的代谢 | 第84-118页 |
| 3.1 材料与方法 | 第86-89页 |
| 3.1.1 马铃薯甲虫饲养与化合物 | 第86页 |
| 3.1.2 dsRNA的准备 | 第86页 |
| 3.1.3 生物测定 | 第86-87页 |
| 3.1.4 qRT-PCR | 第87页 |
| 3.1.5 海藻糖酶活测量 | 第87页 |
| 3.1.6 海藻糖,葡萄糖和糖原含量分析 | 第87-88页 |
| 3.1.7 中间代谢产物分析 | 第88页 |
| 3.1.8 三磷酸腺苷(ATP)分析 | 第88页 |
| 3.1.9 游离氨基酸分析 | 第88-89页 |
| 3.1.10 几丁质分析 | 第89页 |
| 3.1.11 数据分析 | 第89页 |
| 3.2 结果与分析 | 第89-112页 |
| 3.2.1 海藻糖代谢基因的组织表达 | 第89-90页 |
| 3.2.2 敲低LdTPS或LdTRE对马铃薯甲虫幼虫的影响 | 第90-94页 |
| 3.2.3 敲低LdTPS和LdTRE对马铃薯甲虫幼虫海藻糖、葡萄糖和糖原含量的影响 | 第94-99页 |
| 3.2.4 敲低LdTPS和LdTRE对马铃薯甲虫幼虫糖代谢中间产物的影响 | 第99-103页 |
| 3.2.5 敲低LdTPS和LdTRE对马铃薯甲虫幼虫脂肪的影响 | 第103-105页 |
| 3.2.6 敲低LdTPS和LdTRE对马铃薯幼虫游离氨基酸的影响 | 第105-107页 |
| 3.2.7 敲低LdTPS和LdTRE对马铃薯幼虫几丁质的影响 | 第107-109页 |
| 3.2.8 喂食海藻糖和葡萄糖对敲低LdTPS或LdTRE的幼虫的回补效应 | 第109-112页 |
| 3.3 讨论 | 第112-118页 |
| 3.3.1 幼虫血淋巴中的海藻糖含量参与取食调控 | 第112-113页 |
| 3.3.2 海藻糖的合成减少血淋巴中碳水化合物的含量,是促进单糖吸收的途径之一 | 第113-114页 |
| 3.3.3 3个LdTRE基因编码的酶在不同组织降解海藻糖 | 第114-115页 |
| 3.3.4 海藻糖是马铃薯甲虫幼虫几丁质合成的底物 | 第115-118页 |
| 第四章 几丁质的合成 | 第118-142页 |
| 4.1 材料与方法 | 第119-121页 |
| 4.1.1 马铃薯甲虫饲养 | 第119页 |
| 4.1.2 dsRNA的准备 | 第119-120页 |
| 4.1.3 生物测定 | 第120页 |
| 4.1.4 几丁质含量分析 | 第120页 |
| 4.1.5 中肠和气管的完整性分析 | 第120-121页 |
| 4.1.6 qRT-PCR | 第121页 |
| 4.1.7 数据分析 | 第121页 |
| 4.2 结果与分析 | 第121-137页 |
| 4.2.1 LdUAP和LdChS的组织表达 | 第121-123页 |
| 4.2.2 dsUAPs和dsChSs对靶标基因的沉默效应 | 第123-124页 |
| 4.2.3 二龄幼虫取食dsUAP和dsChS对马铃薯甲虫的影响 | 第124-129页 |
| 4.2.4 沉默LdUAP和LdChS对马铃薯甲虫几丁质含量的影响 | 第129-130页 |
| 4.2.5 沉默LdUAP和LdChS对马铃薯甲虫幼虫气管和中肠围食膜的影响 | 第130-133页 |
| 4.2.6 四龄幼虫取食dsUAP和dsChS对马铃薯甲虫生长发育的影响 | 第133-137页 |
| 4.3 讨论 | 第137-142页 |
| 4.3.1 马铃薯甲虫幼虫LdUAP和LdChS的表达 | 第137-138页 |
| 4.3.2 LdUAP1和LdChSA负责外胚层起源的表皮细胞几丁质合成 | 第138-139页 |
| 4.3.3 LdUAP2和LdShSB负责中肠围食膜几丁质的合成 | 第139页 |
| 4.3.4 马铃薯甲虫幼虫的RNA干扰效率具有发育阶段依赖性 | 第139-142页 |
| 第五章 糖代谢与雌虫生殖 | 第142-162页 |
| 5.1 材料与方法 | 第143-145页 |
| 5.1.1 马铃薯甲虫饲养 | 第143页 |
| 5.1.2 dsRNA的准备 | 第143-144页 |
| 5.1.3 生物测定 | 第144页 |
| 5.1.4 qRT-PCR | 第144页 |
| 5.1.5 海藻糖,葡萄糖含量分析 | 第144-145页 |
| 5.1.6 产卵统计 | 第145页 |
| 5.1.7 卵巢表型 | 第145页 |
| 5.1.8 数据分析 | 第145页 |
| 5.2 结果与分析 | 第145-159页 |
| 5.2.1 LdTPS和LdTRE的表达 | 第145-148页 |
| 5.2.2 分别喂食dsTPS、dsTRE1a和dsTRE2对雌虫的影响 | 第148-150页 |
| 5.2.3 dsTPS、dsTRE对马铃薯甲虫雌虫卵形成的影响 | 第150-151页 |
| 5.2.4 敲低LdTPS、LdTRE对马铃薯甲虫雌虫类胰岛素、卵黄原蛋白和几丁质合成相关基因转录的影响 | 第151-153页 |
| 5.2.5 LdUAP和LdChS的时空表达 | 第153-155页 |
| 5.2.6 敲低LdUAP和LdChS对雌虫发育和产卵的影响 | 第155-156页 |
| 5.2.7 敲低LdUAP、LdChS对雌虫卵巢结构和卵形成的影响 | 第156-157页 |
| 5.2.8 敲低LdUAP、LdChS对类胰岛素和卵黄原蛋白基因转录的影响 | 第157-159页 |
| 5.3 讨论 | 第159-162页 |
| 5.3.1 糖代谢基因的表达 | 第159页 |
| 5.3.2 海藻糖为卵子发生提供能量和基质 | 第159-160页 |
| 5.3.3 破坏几丁质结构影响雌虫卵巢结构和卵子发生 | 第160-162页 |
| 全文总结 | 第162-164页 |
| 参考文献 | 第164-182页 |
| 附录 | 第182-194页 |
| 致谢 | 第194-196页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第196页 |
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