摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第11-17页 |
1.1 胚胎干细胞简介与应用 | 第11-12页 |
1.2 小鼠的Naive和Primed多能性状态 | 第12-13页 |
1.3 LIF/STAT3信号通路在维持mESCs自我更新的作用 | 第13-15页 |
1.4 Tfcp211与Esrrb的研究进展 | 第15-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-42页 |
2.1 实验材料 | 第17-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-42页 |
2.2.1 细胞的培养 | 第21-23页 |
2.2.2 细胞的传代 | 第23-24页 |
2.2.3 细胞的冻存 | 第24页 |
2.2.4 细胞的复苏 | 第24-25页 |
2.2.5 细胞计数 | 第25页 |
2.2.6 质粒构建 | 第25-32页 |
2.2.7 稳定细胞系的获得 | 第32-34页 |
2.2.8 过表达或敲低的一些检测 | 第34-37页 |
2.2.9 碱性磷酸酶染色 | 第37-38页 |
2.2.10 免疫荧光 | 第38-39页 |
2.2.11 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第39页 |
2.2.12 双荧光素酶报告基因实验 | 第39-41页 |
2.2.13 mEpiSCs重编程实验 | 第41-42页 |
第三章 实验结果 | 第42-53页 |
3.1 在mESCs中,鉴定Tfcp211下游的直接靶基因 | 第42-46页 |
3.1.1 初筛Tfcp211下游靶基因 | 第42-43页 |
3.1.2 Tfcp211调控下游Esrrb的表达 | 第43-44页 |
3.1.3 Esrrb是Tfcp211的直接下游靶基因 | 第44-46页 |
3.2 在mESCs中,Esrrb介导Tfcp211促进mESCs自我更新 | 第46-50页 |
3.2.1 过表达Tfcp211,敲低Esrrb削弱mESCs自我更新 | 第46-48页 |
3.2.2 过表达Esrrb,敲低Tfcp211不影响mESCs自我更新 | 第48-50页 |
3.3 Esrrb对于Tfcp211促进EpiSCs重编程为naive多能性状态至关重要 | 第50-53页 |
第四章 讨论与展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
附录(附图、附表) | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第69页 |