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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--马铃薯S病毒和马铃薯Y病毒单克隆抗体的制备及应用
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马铃薯S病毒和马铃薯Y病毒单克隆抗体的制备及应用
 
     论文目录
 
致谢第6-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第16-37页
    1. 马铃薯S病毒的研究进展第16-24页
        1.1 寄主范围、传播途径、症状以及分布第16-18页
        1.2 马铃薯S病毒的株系划分第18-19页
        1.3 马铃薯S病毒粒子的形态和基因组结构特征第19-21页
        1.4 马铃薯S病毒的检测技术第21-23页
            1.4.1 生物学检测方法第21页
            1.4.2 电镜观察第21页
            1.4.3 分子生物学方法第21-22页
            1.4.4 血清学检测方法第22-23页
        1.5 马铃薯S病毒的防治策略第23-24页
            1.5.1 生产马铃薯脱毒种薯种苗第23-24页
            1.5.2 选育马铃薯抗病品种第24页
            1.5.3 化学药剂防治第24页
            1.5.4 农业防治第24页
    2 马铃薯Y病毒的研究进展第24-29页
        2.1 寄主范围、症状、传播途径及分布第25页
        2.2 马铃薯Y病毒的株系划分第25-26页
        2.3 马铃薯Y病毒的分子生物学特征第26-27页
        2.4 马铃薯Y病毒的检测技术第27-29页
            2.4.1 生物学鉴定第27页
            2.4.2 电镜观察第27-28页
            2.4.3 分子生物学方法第28页
            2.4.4 血清学检测方法第28-29页
        2.5 马铃薯Y病毒的防治策略第29页
    3. 单克隆抗体技术及其在植物病毒学中的应用第29-37页
        3.1 抗体的结构及特性第31-32页
        3.2 单克隆抗体技术第32-35页
            3.2.1 杂交瘤技术基本原理第32-33页
            3.2.2 杂交瘤技术基本流程第33-34页
            3.2.3 兔单克隆抗体的发展第34-35页
        3.3 单克隆抗体在植物病毒学中的应用第35-37页
第二章 马铃薯S病毒单克隆抗体的制备及应用第37-65页
    1 材料与方法第37-52页
        1.1 病毒材料、培养基、抗体、硝酸纤维素膜、菌株和质粒第37-38页
        1.2 马铃薯S病毒的提纯第38页
        1.3 单克隆抗体的制备第38-41页
            1.3.1 小鼠免疫第38-39页
            1.3.2 细胞融合与培养第39页
            1.3.3 杂交瘤细胞的单克隆化及扩增第39-40页
            1.3.4 杂交瘤细胞株的保存和复苏第40页
            1.3.5 腹水抗体的制备及纯化第40-41页
            1.3.6 腹水抗体效价的测定第41页
            1.3.7 单克隆抗体类型及亚类鉴定第41页
        1.4 单抗特性分析及血清学方法的建立第41-49页
            1.4.1 ACP-ELISA的建立及单抗特性分析第41-43页
            1.4.2 Western blot分析PVS单抗的特异性第43-46页
            1.4.3 DAS-ELISA的建立及其应用第46-47页
            1.4.4 dot-ELISA以及Tissue blot-ELISA的建立及其应用第47-49页
        1.5 RT-PCR方法检测PVS第49-52页
            1.5.1 TRIzol试剂法提取总RNA第49-50页
            1.5.2 RT-PCR第50-52页
    2 实验结果与分析第52-62页
        2.1 马铃薯S病毒的提纯及抗原制备第52-53页
        2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆第53页
        2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定第53页
        2.4 PVS单抗的Western blot分析第53-54页
        2.5 ACP-ELISA方法的建立及单抗特异的分析第54-56页
            2.5.1 检测马铃薯植物中PVS的ACP-ELISA方法的建立第54页
            2.5.2 ACP-ELISA方法分析PVS单抗特异性第54-55页
            2.5.3 ACP-ELISA方法分析PVS单抗的灵敏度第55-56页
            2.5.4 ACP-ELISA方法检测田间马铃薯中的PVS第56页
        2.6 DAS-ELISA检测方法的建立及应用第56-59页
            2.6.1 检测马铃薯植物中PVS的DAS-ELISA的建立第56-57页
            2.6.2 DAS-ELISA方法的特异性分析第57页
            2.6.3 DAS-ELISA方法的灵敏度分析第57-58页
            2.6.4 DAS-ELISA方法的检测应用第58-59页
        2.7 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA检测方法的建立及应用第59-62页
            2.7.1 检测马铃薯植物中PVS的dot-ELISA和Tissue blot-ELISA的建立第59页
            2.7-2 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法的特异性分析第59-60页
            2.7.3 dot-ELISA方法的灵敏度分析第60-61页
            2.7.4 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法的田间应用第61-62页
    3 讨论第62-65页
第三章 马铃薯Y病毒单克隆抗体的制备及应用第65-80页
    1 材料与方法第65-68页
        1.1 病毒材料、培养基和抗体、硝酸纤维素膜、生化试剂第65页
        1.2 马铃薯Y病毒的提纯第65-66页
        1.3 杂交瘤细胞的制备第66页
        1.4 腹水制备和抗体纯化第66页
        1.5 抗体腹水效价的测定和类型及亚类鉴定第66页
        1.6 Western blot分析PVY单抗的特异性第66页
        1.7 检测PVY血清学方法和IC-RT-PCR方法的建立及其应用第66-68页
            1.7.1 ACP-ELISA检测方法的建立及单抗特性分析第66-67页
            1.7.2 dot-blot ELISA和Tissue blot-ELISA的建立及检测应用第67页
            1.7.3 IC-RT-PCR的建立及灵敏度分析第67-68页
            1.7.4 RT-PCR方法检测PVY第68页
            1.7.5 ACP-ELISA、dot-ELISA、Tissue blot-ELISA血清学方法的田间应用第68页
    2 实验结果与分析第68-77页
        2.1 马铃薯Y病毒的提纯第69页
        2.2 细胞的融合、杂交瘤的筛选和克隆第69页
        2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定第69-70页
        2.4 Western blot分析PVY单抗的特异性第70-71页
        2.5 ACP-ELISA方法的建立及应用第71-73页
            2.5.1 检测PVY的ACP-ELISA方法的建立第71页
            2.5.2 ACP-ELISA方法分析PVY单抗的特异性第71-72页
            2.5.3 ACP-ELISA方法分析PVY单抗的灵敏度第72-73页
            2.5.4 ACP-ELISA方法的田间检测应用第73页
        2.6 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法的建立及应用第73-76页
            2.6.1 检测PVY的dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法的建立第73页
            2.6.2 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法的特异性分析第73-74页
            2.6.3 dot-ELISA的灵敏度分析第74-75页
            2.6.4 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法田间检测应用第75-76页
        2.7 IC-RT-PCR方法的建立及应用第76-77页
    3 讨论第77-80页
参考文献第80-91页
附录A 本论文中所用病毒缩写及中英文对照第91-92页
附录B 常用生化及分子生物学试剂与仪器第92-94页
附录C 常用缓冲液及培养基配方第94-98页
在学期间所取得的科研成果第98页

 
 
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