| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-17页 |
| ·昆虫海藻糖酶的研究概况 | 第10-12页 |
| ·昆虫海藻糖的发现及功能 | 第10页 |
| ·昆虫海藻糖酶的种类和特性 | 第10-11页 |
| ·昆虫海藻糖酶的功能研究 | 第11-12页 |
| ·实时荧光定量PCR技术和RNAi技术的应用 | 第12-17页 |
| ·实时荧光定量PCR技术 | 第13页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第13-14页 |
| ·赤拟谷盗研究进展 | 第14-15页 |
| ·本论文的研究方法、目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 5个TcTres基因的克隆与分析 | 第17-32页 |
| ·实验材料与仪器 | 第17-18页 |
| ·实验虫源 | 第17页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-22页 |
| ·引物设计与合成 | 第18页 |
| ·赤拟谷盗总RNA的提取 | 第18-19页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第19页 |
| ·PCR反应 | 第19-20页 |
| ·目标片段的回收与纯化 | 第20页 |
| ·连接反应 | 第20页 |
| ·大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·转化过程 | 第21页 |
| ·菌落PCR验证 | 第21页 |
| ·甘油菌的制备及测序 | 第21-22页 |
| ·序列的测定与分析 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-30页 |
| ·赤拟谷盗总RNA的抽提 | 第22页 |
| ·PCR产物的测序及验证 | 第22-23页 |
| ·5个TcTres基因的cDNA序列全长 | 第23-27页 |
| ·5个TcTres基因cDNA序列生物学信息分析 | 第27-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 5个TcTres基因的组织分布和不同龄期的表达模式 | 第32-42页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验虫源 | 第32页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·TcTres基因的组织分布 | 第33页 |
| ·不同龄期5个TcTres基因的发育表达模式 | 第33-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-40页 |
| ·5个TcTres基因组织分布 | 第35-36页 |
| ·不同龄期5个TcTres基因的发育表达模式 | 第36-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 赤拟谷盗海藻糖酶基因的功能研究 | 第42-68页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·实验虫源 | 第42页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第42-43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-47页 |
| ·dsRNA的合成 | 第43-46页 |
| ·赤拟谷盗dsRNA的注射 | 第46-47页 |
| ·赤拟谷盗RNAi后取样和表型观察 | 第47页 |
| ·定量检测5个TcTres基因及相关基因的相对表达量 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-62页 |
| ·赤拟谷盗5个TcTres和GFP的带T7启动子的cDNA片段的合成 | 第47-49页 |
| ·赤拟谷盗5个TcTres和GFP的dsRNA的合成 | 第49-50页 |
| ·赤拟谷盗RNAi的效率评估及相关基因特异性检测 | 第50-51页 |
| ·dsRNA注射赤拟谷盗8L幼虫及5个TcTres基因的相对表达量的测定 | 第51-55页 |
| ·赤拟谷盗8 L幼虫RNAi后各RNA干扰组表型的分析 | 第55-57页 |
| ·8L幼虫TcTres基因表达抑制后下游通路相关关键基因表达的定量检测 | 第57-60页 |
| ·7L幼虫TcTres基因表达抑制后相关基因表达的测定 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-68页 |
| ·5个TcTres基因的特异性表达与互补 | 第63页 |
| ·TcTre1-1在赤拟谷盗整个发育史中的蜕皮阶段的功能 | 第63-64页 |
| ·TcTre1-2在赤拟谷盗生长发育中的功能 | 第64页 |
| ·TcTre1-3在赤拟谷盗生长发育和几丁质合成中的功能 | 第64-65页 |
| ·TcTre1-4在赤拟谷盗生长发育中的功能 | 第65-66页 |
| ·TcTre2在赤拟谷盗生长发育中的功能 | 第66-68页 |
| 第五章 结论与展望 | 第68-69页 |
| ·赤拟谷盗5个TcTres cDNA全长序列的克隆与验证 | 第68页 |
| ·赤拟谷盗5个TcTres基因组织分布和不同龄期的表达模式 | 第68页 |
| ·赤拟谷盗5个TcTres基因的功能 | 第68页 |
| 展望 | 第68-69页 |
| 本论文的创新点 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录Ⅰ | 第77-78页 |
| 附录Ⅱ | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
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