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强启动子枯草芽孢杆菌核黄素操纵子整合型载体的构建并在枯草芽孢杆菌中的表达 |
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论文目录 |
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中文摘要 | 第1-4页 | ABSTRACT | 第4-8页 | 前言 | 第8-9页 | 第一章 文献综述 | 第9-26页 | ·核黄素的生产 | 第9页 | ·产核黄素基因工程菌研究现状 | 第9-10页 | ·B.subtilis产核黄素工程菌 | 第10-12页 | ·B.subtilis核黄素操纵子结构 | 第10-11页 | ·B.subtilis核黄素操纵子编码产物的功能 | 第11-12页 | ·B.subtilis产核黄素工程菌的优点 | 第12页 | ·B.subtilis 合成核黄素的代谢工程 | 第12-17页 | ·代谢工程的基本原理 | 第12-13页 | ·B.subtilis 合成核黄素的代谢分析 | 第13-15页 | ·B.subtilis产核黄素工程菌构建思路 | 第15-17页 | ·B.subtilis 中的同源重组 | 第17-19页 | ·RecA蛋白的功能 | 第17-18页 | ·同源重组的相关基因簇及表达产物 | 第18-19页 | ·枯草芽孢杆菌中质粒的复制及稳定性 | 第19-20页 | ·B.subtilis 整合型质粒 | 第20-24页 | ·整合型质粒的原理 | 第20-21页 | ·整合型质粒的用途 | 第21-24页 | ·常见的枯草芽孢杆菌整合型质粒 | 第24页 | ·克隆位点整合的质粒 | 第24页 | ·定点整合的质粒 | 第24页 | ·本文的主要研究内容 | 第24-26页 | 第二章 实验材料和方法 | 第26-41页 | ·实验材料 | 第26-32页 | ·菌种和质粒 | 第26-27页 | ·主要实验仪器 | 第27页 | ·药品与试剂 | 第27-30页 | ·主要药品 | 第27-28页 | ·主要试剂 | 第28-30页 | ·培养基 | 第30-32页 | ·核黄素的发酵和测定方法 | 第32-33页 | ·菌体生长曲线的测定 | 第32页 | ·菌种的纯化和保藏 | 第32页 | ·发酵初筛 | 第32页 | ·发酵液中核黄素的测定 | 第32-33页 | ·基因工程方法 | 第33-41页 | ·原生质体转化 | 第33-34页 | ·原生质体的制备 | 第33页 | ·原生质体转化 | 第33-34页 | ·Spizizen 转化 | 第34页 | ·质粒的小规模提取 | 第34页 | ·枯草芽孢杆菌质粒的大规模提取 | 第34-35页 | ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第35-36页 | ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 | ·大肠杆菌的转化 | 第36页 | ·革兰氏阳性菌染色体DNA的提取 | 第36页 | ·用于转化和构建载体的DNA片段的制备 | 第36-38页 | ·PCR 扩增recA 基因 | 第36-37页 | ·PCR扩增核黄素操纵子 | 第37页 | ·PCR 扩增ribA 结构基因 | 第37-38页 | ·DNA 的酶切和连接 | 第38-39页 | ·DNA的酶切 | 第38页 | ·DNA的连接 | 第38-39页 | ·DNA 片段的回收和纯化 | 第39-41页 | ·琼脂糖凝胶中DNA片段的回收和纯化 | 第39页 | ·水溶液中DNA片段的纯化和浓缩 | 第39-41页 | 第三章 实验结果和讨论 | 第41-55页 | ·受体菌的改造 | 第42-44页 | ·recA基因的扩增及酶切鉴定 | 第43页 | ·DNA片段的原生质体转化及recA+菌株的筛选 | 第43-44页 | ·产核黄素整合型表达载体的构建 | 第44-49页 | ·SPO2-rib 整合型表达载体的构建 | 第45-46页 | ·P43-rib 整合型表达载体的构建 | 第46-47页 | ·P1-rib(原启动子)产核黄素整合型表达载体的构建 | 第47-49页 | ·PCR扩增枯草杆菌核黄素操纵子 | 第48页 | ·整合型表达载体的构建 | 第48-49页 | ·整合型表达载体在E.coli中的表达 | 第49页 | ·整合型表载体在B.subtilis中的表达 | 第49-52页 | ·质粒Spizizen法转化B.subtilis D3 | 第50页 | ·转化子的整合方式和核黄素产量 | 第50-52页 | ·ribA 基因载体的构建和表达 | 第52-55页 | ·PCR扩增枯草杆菌ribA结构基因 | 第52-53页 | ·克隆载体的构建 | 第53-55页 | 第四章 结论 | 第55-56页 | 参考文献 | 第56-60页 | 附录 | 第60-71页 | Ⅰ 生化名词缩写表 | 第60-62页 | Ⅱ pUC86构建示意图 | 第62-64页 | Ⅲ pUC83构建示意图 | 第64-66页 | Ⅳ pDRI 构建示意图 | 第66-67页 | Ⅴ pDRII构建示意图 | 第67-68页 | Ⅵ pDRIII 构建示意图 | 第68-69页 | Ⅶ 常用限制性内切酶的在不同缓冲液中的活性 | 第69-71页 | 论文发表 | 第71-72页 | 致谢 | 第72页 |
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