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马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因的克隆、表达分析及其dsRNA的发酵生产 |
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| 摘要 | 第1-10页 | | ABSTRACT | 第10-13页 | | 缩略词 | 第13-16页 | | 第一章 文献综述 | 第16-36页 | | 1 马铃薯甲虫是全球范围重要的鞘翅目害虫 | 第16-23页 | | ·马铃薯甲虫的起源 | 第16-17页 | | ·马铃薯甲虫的形态特征 | 第17-18页 | | ·马铃薯甲虫分布区及寄主植物的扩大 | 第18-20页 | | ·马铃薯甲虫的年生活史 | 第20-23页 | | 2 马铃薯甲虫对我国的入侵 | 第23-25页 | | ·马铃薯甲虫在我国的扩散及其潜在风险 | 第23-24页 | | ·防控马铃薯甲虫扩散蔓延的对策措施 | 第24页 | | ·进一步防控马铃薯甲虫向东扩散蔓延的关键措施 | 第24-25页 | | 3 马铃薯甲虫长距离飞行与脯氨酸脱氢酶 | 第25-26页 | | 4 RNA干扰的研究概况 | 第26-35页 | | ·RNA干扰的研究的历史 | 第26-27页 | | ·RNA干扰的分子机理 | 第27-32页 | | ·转录后基因沉默机理 | 第28页 | | ·RNA干扰的起始阶段 | 第28-29页 | | ·RNA干扰的效应阶段 | 第29页 | | ·RNA解旋酶蛋白家族 | 第29-30页 | | ·沉默信号的传递与放大 | 第30-31页 | | ·蛋白质翻译水平 | 第31页 | | ·RNA介导的基因组甲基化 | 第31-32页 | | ·系统性RNA干扰 | 第32-35页 | | ·线虫中的系统性RNA干扰 | 第32-33页 | | ·蜜蜂中的系统性RNA干扰 | 第33页 | | ·果蝇中的细胞自主性RNA干扰 | 第33-34页 | | ·人类中的系统性RNA干扰 | 第34页 | | ·德国小蠊中的RNA干扰 | 第34页 | | ·蝗虫中的RNA干扰 | 第34页 | | ·其他昆虫中的RNA干扰 | 第34-35页 | | 5 本文的研究目的 | 第35-36页 | | 第二章 马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因全长克隆 | 第36-52页 | | 1 材料与方法 | 第36-45页 | | ·供试昆虫 | 第36-37页 | | ·主要试剂和仪器设备 | 第37页 | | ·主要试剂 | 第37页 | | ·主要仪器设备 | 第37页 | | ·总RNA的提取 | 第37-38页 | | ·cDNA第一链的合成 | 第38-39页 | | ·5'-RACE-Ready cDNA和3'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第39-40页 | | ·5'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第39-40页 | | ·3'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第40页 | | ·PCR引物 | 第40-41页 | | ·PCR反应 | 第41-42页 | | ·普通PCR反应体系及条件 | 第41-42页 | | ·RACE PCR反应体系及条件 | 第42页 | | ·常规分子克隆分子克隆 | 第42-45页 | | ·PCR产物的回收与纯化 | 第42-43页 | | ·连接反应 | 第43页 | | ·连接产物的转化、单克隆 | 第43-44页 | | ·重组质粒的提取及检测 | 第44-45页 | | ·序列测定与分析 | 第45页 | | 2 结果与分析 | 第45-50页 | | ·马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因片段的克隆 | 第45-46页 | | ·马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶的RACE全长克隆 | 第46-47页 | | ·马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶cDNA全长序列及聚类树状图的构建 | 第47-50页 | | 3 讨论 | 第50-52页 | | 第三章 马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因表达分析 | 第52-60页 | | 1 材料与方法 | 第53-55页 | | ·end-to-end RT-PCR分别验证3个转录异型体 | 第53页 | | ·半定量用模板的准备 | 第53-54页 | | ·越冬前后马铃薯甲虫总RNA的提取 | 第53页 | | ·cDNA第一链的合成 | 第53页 | | ·越冬前后马铃薯甲虫DNA的提取 | 第53-54页 | | ·3个转录异型体在越冬前后表达丰度的差异 | 第54-55页 | | 2 结果与分析 | 第55-57页 | | ·End-to-end PCR验证RACE结果 | 第55页 | | ·3个转录异型体在越冬前后表达丰度的差异 | 第55-57页 | | 3 讨论 | 第57-60页 | | 第四章 类SID-1基因CDNA片段克隆与进化分析 | 第60-68页 | | 1 材料与方法 | 第61-62页 | | ·实验材料 | 第61页 | | ·类sid-1基因的预测 | 第61页 | | ·RACE PCR克隆类sid-1基因 | 第61页 | | ·End-to-end验证拼接的RACE序列 | 第61-62页 | | ·进化分析 | 第62页 | | 2 结果与分析 | 第62-66页 | | ·类sid-1基因的生物信息预测结果 | 第62-63页 | | ·RACE PCR结果 | 第63-64页 | | ·End-to-end PCR验证RACE结果 | 第64-65页 | | ·进化树分析 | 第65-66页 | | 3 讨论 | 第66-68页 | | 第五章 应用微生物发酵技术获得马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因双链RNA初步研究 | 第68-74页 | | 1 材料与方法 | 第69-70页 | | ·实验材料 | 第69页 | | ·双链RNA表达载体构建 | 第69页 | | ·双链RNA在大肠杆菌中的表达 | 第69-70页 | | ·双链RNA发酵条件的优化 | 第70页 | | 2 结果与分析 | 第70-72页 | | ·dsRNA表达载体构建 | 第70-71页 | | ·双链RNA在大肠杆菌中的表达 | 第71-72页 | | ·双链RNA发酵条件的优化 | 第72页 | | 3 讨论 | 第72-74页 | | 全文总结 | 第74-76页 | | 参考文献 | 第76-86页 | | 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第86-88页 | | 致谢 | 第88页 |
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论文编号BS479449，这篇论文共88页
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