摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
前言 | 第14-40页 |
1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第14-32页 |
·对虾白斑综合症病毒的研究概况 | 第14-20页 |
·对虾白斑综合症病毒的发现及其命名 | 第14-15页 |
·对虾白斑综合症病毒的形态结构 | 第15-16页 |
·对虾白斑综合症的症状与病理变化 | 第16-17页 |
·对虾白斑综合症病毒的感染宿主及替代宿主 | 第17-18页 |
·对虾白斑综合症病毒的传播途径 | 第18页 |
·对虾白斑综合症病毒在宿主体内的感染组装 | 第18-20页 |
·对虾白斑综合症病毒在对虾体内的感染增殖 | 第20页 |
·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第20-21页 |
·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第21-24页 |
·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第24-32页 |
·对虾白斑综合症病毒的结构蛋白 | 第25-32页 |
·对虾白斑综合症病毒的非结构蛋白 | 第32页 |
2 RNA 干扰的研究进展 | 第32-37页 |
·RNA 干扰现象的发现 | 第32页 |
·RNA 干扰的作用机理 | 第32-33页 |
·RNA 干扰技术的主要应用 | 第33-37页 |
3 本论文研究的内容、目的和意义 | 第37-40页 |
第一部分 对虾白斑综合症病毒核衣壳蛋白 VP15 的初步研究 | 第40-63页 |
1 前言 | 第40页 |
2 材料与方法 | 第40-51页 |
·材料 | 第40-42页 |
·方法 | 第42-51页 |
·WSSV 病毒及VP15 的提取 | 第42-44页 |
·Superdex G-200 凝胶过滤色谱层析分析VP15 多聚体状态 | 第44-45页 |
·VP15 与核酸最小结合片段研究 | 第45-46页 |
·VP15 与核衣壳蛋白相互作用研究 | 第46-47页 |
·VP15 长双链RNA 的合成与对病毒增殖及包装的干扰 | 第47-51页 |
3 结果 | 第51-61页 |
·VP15 的纯化 | 第51-52页 |
·VP15 多聚体状态分析 | 第52页 |
·VP15 与核酸最小结合片段研究 | 第52-55页 |
·DNA –Protein interaction: Electrophoretic mobility shift assay | 第52-54页 |
·DNA –Protein interaction: dot spot | 第54-55页 |
·VP15 与衣壳蛋白相互作用研究 | 第55-57页 |
·Far-western 分析VP15 与衣壳蛋白相互作用 | 第55-56页 |
·结合共沉淀进一步确定VP15 与衣壳蛋白无相互作用 | 第56-57页 |
·VP15 长双链RNA 的合成与对病毒增殖及包装的干扰 | 第57-61页 |
·vp15-dsRNA 和 gfp-dsRNA 制备 | 第57-58页 |
·vp15-dsRNA 干扰了VP15 基因的转录 | 第58-59页 |
·vp15-dsRNA 抑制了WSSV 增殖 | 第59页 |
·vp15-dsRNA 影响了病毒粒子的装配 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
第二部分 核衣壳蛋白 VP15 降解现象的初步研究 | 第63-70页 |
1 前言 | 第63页 |
2 材料与方法 | 第63-64页 |
·材料 | 第63页 |
·方法 | 第63-64页 |
·VP15 和FITC-VP15 透析 | 第63页 |
·VP15 不同pH 透析 | 第63页 |
·DNA 对VP15 降解的影响 | 第63-64页 |
·蛋白酶抑制剂、EDTA 或者加热对VP15 降解的影响 | 第64页 |
·VP15 与其他蛋白混合后透析分析 | 第64页 |
3 结果 | 第64-68页 |
·FITC 标记对VP15 降解的影响 | 第64-65页 |
·不同pH 对VP15 降解的影响 | 第65-66页 |
·DNA 对VP15 降解的影响 | 第66页 |
·蛋白酶抑制剂、EDTA 以及加热对VP15 降解的影响 | 第66-67页 |
·VP15 与其他蛋白混合后透析分析 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
第三部分 对虾白斑综合症病毒核衣壳衣壳粒的初步研究 | 第70-82页 |
1 前言 | 第70-71页 |
2 材料与方法 | 第71-72页 |
·材料 | 第71页 |
·方法 | 第71-72页 |
·不同试剂处理核衣壳 | 第71页 |
·透射电子显微镜分析 | 第71页 |
·尿素浓度梯度处理核衣壳 | 第71-72页 |
3 结果 | 第72-80页 |
·核衣壳酸碱耐受性研究 | 第72-74页 |
·蛋白变性剂(尿素、盐酸胍)可使核衣壳解聚 | 第74-78页 |
·核衣壳分子间作用力为二硫键 | 第78-80页 |
4 讨论 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-95页 |
致谢 | 第95页 |