| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-35页 |
| 第一章 猪圆环病毒研究进展 | 第13-27页 |
| 1 PCV概况 | 第13-14页 |
| 2 病原学 | 第14-16页 |
| ·病毒的理化特性 | 第14-15页 |
| ·PCV基因组结构及编码蛋白 | 第15-16页 |
| 3 致病机理 | 第16-17页 |
| 4 流行病学 | 第17-18页 |
| 5 PCV2相关疾病 | 第18-21页 |
| ·断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) | 第18-19页 |
| ·猪皮炎与肾病综合征(PDNS) | 第19页 |
| ·猪呼吸道疾病综合征(PRDC) | 第19-20页 |
| ·增生性坏死性间质性肺炎(PNP) | 第20页 |
| ·繁殖障碍 | 第20页 |
| ·猪先天性震颤(CT) | 第20-21页 |
| 6 PCV2诊断方法 | 第21-27页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第21页 |
| ·血清学方法 | 第21-24页 |
| ·分子生物学方法 | 第24-27页 |
| 参考文献 | 第27-35页 |
| 第二部分 试验研究 | 第35-87页 |
| 第一章 我国部分地区猪圆环病毒2型的亚型鉴定 | 第35-47页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 1 材料和方法 | 第35-38页 |
| ·临床病料 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·病料DNA的提取和阳性病料的筛选 | 第36-37页 |
| ·PCV2全基因序列的扩增和测序 | 第37-38页 |
| ·全基因序列的拼接和进化分析 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-43页 |
| ·阳性病料的筛选 | 第38页 |
| ·PCV2全基因序列的扩增和测序 | 第38-39页 |
| ·PCV2全基因序列及遗传变异分析 | 第39-40页 |
| ·PCV2 ORF2及其编码的氨基酸序列的同源性比较 | 第40-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-46页 |
| ABSTRACT | 第46-47页 |
| 第二章 两种猪圆环病毒2型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 | 第47-63页 |
| 摘要 | 第47-48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-51页 |
| ·菌株、毒株及病料 | 第48页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第48-49页 |
| ·引物和探针的设计及合成 | 第49页 |
| ·重组质粒标准品的制备 | 第49-50页 |
| ·Real-time PCR检测方法的建立 | 第50-51页 |
| ·临床样品的检测 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-58页 |
| ·质粒标准品的制备 | 第51-53页 |
| ·Real-time PCR反应条件的优化 | 第53页 |
| ·Real-time PCR标准曲线的建立 | 第53-55页 |
| ·Real-time PCR的敏感性分析 | 第55-56页 |
| ·Real-time PCR的重复性分析 | 第56-57页 |
| ·Real-time PCR的特异性分析 | 第57页 |
| ·临床样品的检测 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| ABSTRACT | 第62-63页 |
| 第三章 猪圆环病毒2型两亚型分离株在PK15细胞上的增殖特性研究 | 第63-73页 |
| 摘要 | 第63页 |
| 1 材料和方法 | 第63-65页 |
| ·临床样品 | 第63页 |
| ·细胞 | 第63页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第63-64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·阳性病料的筛选 | 第64页 |
| ·PCV2全基因序列的扩增、测序和基因分型 | 第64页 |
| ·PCV2两亚型的分离 | 第64页 |
| ·间接免疫荧光鉴定 | 第64-65页 |
| ·PCV2两亚型的体外增殖和TCID_(50)测定 | 第65页 |
| ·PCV2a和PCV2b在PK15细胞上的生长曲线 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-70页 |
| ·接种临床病料的筛选 | 第65-66页 |
| ·PK15细胞的病变情况 | 第66页 |
| ·PCR检测 | 第66-67页 |
| ·间接免疫荧光鉴定 | 第67-68页 |
| ·PCV2全基因序列的扩增、测序和基因分型鉴定 | 第68页 |
| ·PCV2两亚型毒株不同代次细胞毒的TCID5o测定 | 第68-69页 |
| ·PCV2a和PCV2b在PK15细胞上的生长曲线 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-72页 |
| ABSTRACT | 第72-73页 |
| 第四章 猪圆环病毒2型两亚型分离株在Balb/c小鼠体内的增殖特性研究 | 第73-87页 |
| 摘要 | 第73页 |
| 1 材料和方法 | 第73-76页 |
| ·病毒 | 第73页 |
| ·实验动物 | 第73页 |
| ·主要的试剂和仪器 | 第73-74页 |
| ·试验设计 | 第74页 |
| ·体重称量 | 第74页 |
| ·血清的获取 | 第74页 |
| ·血清抗体水平检测 | 第74-75页 |
| ·血清病毒含量检测 | 第75页 |
| ·各脏器中病毒含量检测 | 第75页 |
| ·TaqMan实时荧光定量PCR | 第75-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-81页 |
| ·小鼠体重增长率的差异 | 第76-77页 |
| ·血清抗体水平检测 | 第77-78页 |
| ·血清病毒含量检测 | 第78-79页 |
| ·各脏器中病毒含量检测 | 第79-81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| ABSTRACT | 第85-87页 |
| 全文总结 | 第87-89页 |
| 附录 常用试剂配制 | 第89-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
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