摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 可再生资源半纤维素 | 第11-12页 |
1.2 木糖苷酶的研究进展 | 第12-19页 |
1.2.1 木聚糖酶解 | 第12页 |
1.2.2 木聚糖酶和β-木糖苷酶的分类 | 第12-14页 |
1.2.3 β-木糖苷酶的来源 | 第14页 |
1.2.4 β-木糖苷酶的酶学性质 | 第14-16页 |
1.2.5 β-木糖苷酶的结构特点 | 第16-17页 |
1.2.6 β-木糖苷酶的催化机理 | 第17-19页 |
1.3 β-木糖苷酶的应用 | 第19-20页 |
1.4 课题研究目的和内容 | 第20-22页 |
第二章 β-木糖苷酶产生菌的分离筛选和种属鉴定 | 第22-42页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 材料 | 第22-24页 |
2.2.1 土壤来源 | 第22页 |
2.2.2 主要培养基 | 第22-23页 |
2.2.3 主要试剂和相关溶液 | 第23-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-30页 |
2.3.1 富集培养及筛选分离 | 第24页 |
2.3.2 菌种的复筛 | 第24-25页 |
2.3.3 筛选菌株的发酵产酶 | 第25页 |
2.3.4 筛选产酶最优菌的产酶积累曲线 | 第25页 |
2.3.5 β-木糖苷酶酶活性测定方法 | 第25-26页 |
2.3.6 Bradford(G-250)法测定蛋白质浓度 | 第26-27页 |
2.3.7 克隆实验 | 第27-29页 |
2.3.8 16S rDNA序列分析及构建进化树 | 第29页 |
2.3.9 形态观察 | 第29页 |
2.3.10 菌株的生理生化鉴定 | 第29-30页 |
2.4 结果与讨论 | 第30-41页 |
2.4.1 标准曲线的绘制 | 第30-31页 |
2.4.2 菌种的分离纯化和产酶优势菌的筛选 | 第31-34页 |
2.4.3 16S rDNA克隆及生物进化关系分析 | 第34-37页 |
2.4.4 形态学特征 | 第37-39页 |
2.4.5 生理生化实验结果 | 第39-41页 |
2.5 本章小结 | 第41-42页 |
第三章 Enterobacter cloacae LY-62 产β-木糖苷酶条件的初步优化 | 第42-52页 |
3.1 引言 | 第42-43页 |
3.2 材料 | 第43页 |
3.3 实验方法 | 第43-45页 |
3.3.1 发酵产酶培养 | 第43页 |
3.3.2 β-木糖苷酶酶活性测定方法 | 第43页 |
3.3.3 Bradford(G-250)法测定蛋白质浓度 | 第43页 |
3.3.4 碳源种类和碳源浓度的优化实验 | 第43页 |
3.3.5 氮源种类和氮源浓度的优化实验 | 第43-44页 |
3.3.6 发酵培养基起始pH的优化实验 | 第44页 |
3.3.7 发酵培养温度的优化实验 | 第44页 |
3.3.8 优化发酵条件下的产酶积累曲线 | 第44页 |
3.3.9 优化发酵条件下的生长曲线测定 | 第44-45页 |
3.4 结果与讨论 | 第45-51页 |
3.4.1 标准曲线的绘制 | 第45页 |
3.4.2 碳源对Enterobacter cloacae LY-62 产β-木糖苷酶的影响 | 第45-46页 |
3.4.3 氮源对Enterobacter cloacae LY-62 产酶的影响 | 第46-47页 |
3.4.4 培养基起始pH值对Enterobacter cloacae LY-62 产酶的影响 | 第47-48页 |
3.4.5 发酵温度对Enterobacter cloacae LY-62 产酶的影响 | 第48-49页 |
3.4.6 条件优化后菌株LY-62 的产酶进程和生长曲线 | 第49-51页 |
3.5 本章小结 | 第51-52页 |
第四章 Enterobacter cloacae LY-62 的β-木糖苷酶基因的克隆表达及生物信息学分析 | 第52-78页 |
4.1 引言 | 第52页 |
4.2 材料 | 第52页 |
4.3 实验方法 | 第52-58页 |
4.3.1 基因克隆的引物设计及扩增β-木糖苷酶片段 | 第52-54页 |
4.3.2 基因的克隆实验 | 第54页 |
4.3.3 β-木糖苷酶基因序列分析 | 第54页 |
4.3.4 β-木糖苷酶基因序列的生物信息学分析 | 第54-55页 |
4.3.5 β-木糖苷酶基因的表达及目的蛋白的纯化 | 第55-56页 |
4.3.6 SDS-PAGE电泳 | 第56页 |
4.3.7 β-木糖苷酶的酶学性质测定 | 第56-58页 |
4.4 结果与讨论 | 第58-75页 |
4.4.1 PCR特异扩增β-木糖苷酶基因 | 第58-59页 |
4.4.2 菌株LY-62 的β-木糖苷酶基因序列分析 | 第59-60页 |
4.4.3 β-木糖苷酶生物信息学分析 | 第60-70页 |
4.4.4 β-木糖苷酶基因的表达和目的蛋白的纯化 | 第70-72页 |
4.4.5 β-木糖苷酶的的酶学性质 | 第72-75页 |
4.5 本章小结 | 第75-78页 |
结果与展望 | 第78-80页 |
1、创新点 | 第78页 |
2、主要结论 | 第78-79页 |
3、展望 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-85页 |
附录 | 第85-91页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
附件 | 第93页 |