摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-23页 |
1.1 甘蓝型油菜产量性状研究进展 | 第10-11页 |
1.2 甘蓝型油菜千粒重的遗传与分子生物学研究 | 第11-14页 |
1.2.1 甘蓝型油菜千粒重的遗传研究 | 第11-12页 |
1.2.2 甘蓝型油菜千粒重的分子生物学研究 | 第12-14页 |
1.3 植物种子大小研究进展 | 第14-20页 |
1.3.1 MAPK途径 | 第15页 |
1.3.2 G-Protein途径 | 第15-16页 |
1.3.3 IKU途径 | 第16-17页 |
1.3.4 激素途径 | 第17-18页 |
1.3.5 转录因子途径 | 第18-20页 |
1.4 泛素蛋白酶体途径与种子大小的关系 | 第20-22页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 试验材料 | 第23页 |
2.2 材料的种植与管理 | 第23页 |
2.3 技术路线 | 第23-24页 |
2.4 qSW.C9的克隆及在甘蓝型油菜中拷贝数分析 | 第24页 |
2.5 农杆菌介导的遗传转化 | 第24-32页 |
2.5.1 载体与菌株 | 第24页 |
2.5.2 受体材料 | 第24页 |
2.5.3 载体构建 | 第24-31页 |
2.5.4 甘蓝型油菜遗传转化 | 第31页 |
2.5.5 拟南芥遗传转化 | 第31-32页 |
2.6 转基因检测 | 第32页 |
2.6.1 DNA水平的检测 | 第32页 |
2.6.2 表型鉴定 | 第32页 |
2.7 基因的表达分析 | 第32-33页 |
2.7.1 RT-PCR分析 | 第32-33页 |
2.7.2 qPCR分析 | 第33页 |
2.7.3 GUS染色分析 | 第33页 |
2.8 亚细胞定位分析 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-45页 |
3.1 qSW.C9基因的克隆 | 第34-37页 |
3.1.1 候选基因的预测 | 第34页 |
3.1.2 候选基因的比较测序 | 第34-35页 |
3.1.3 候选基因的转基因验证 | 第35-37页 |
3.2 qSW.C9基因表达模式分析 | 第37-40页 |
3.2.1 RT-PCR分析和qPCR分析 | 第37-40页 |
3.2.2 GUS染色分析 | 第40页 |
3.3 十字花科BnaC9.RINGb同源基因的进化分析 | 第40-42页 |
3.4 拟南芥qSW.C9同源基因功能研究 | 第42-44页 |
3.4.1 基因型鉴定 | 第42-43页 |
3.4.2 表型鉴定 | 第43-44页 |
3.5 亚细胞定位分析 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 BnaC9.RINGb可能是一个油菜籽粒大小的主效QTL | 第45-46页 |
4.2 进一步的设想 | 第46-48页 |
4.2.1 进一步确定BnaC9.RINGb候选基因的设想 | 第46页 |
4.2.2 BnaC9.RINGb蛋白的表达及纯化 | 第46页 |
4.2.3 BnaC9.RINGb互作蛋白的筛选 | 第46-47页 |
4.2.4 BnaC9.RINGb基因调控千粒重分子机理解析 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-57页 |
附录Ⅰ:本实验中所用引物 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |