中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
缩略语 | 第11-13页 |
前言 | 第13-18页 |
研究现状、成果 | 第13-17页 |
研究目的、方法 | 第17-18页 |
一、甲状腺激素受体B新亚型TRβ△可变剪接的蛋白水平研究 | 第18-66页 |
·对象和方法 | 第18-37页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·带有报告基因的小基因构建、改造及体外转染 | 第20-35页 |
·实时荧光定量PCR检测不同组织中TRβ△和TRβ1 mRNA的表达水平 | 第35-37页 |
·结果 | 第37-55页 |
·琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第37页 |
·重组质粒的酶切及突变鉴定结果 | 第37-40页 |
·RT-PCR测定剪接结果 | 第40-44页 |
·绿色荧光蛋白检视 | 第44-47页 |
·荧光素酶的活性值分析结果 | 第47-49页 |
·T3处理后不同细胞系荧光素酶活性分析结果 | 第49-51页 |
·不同剂量T3处理后大鼠肝细胞系BRL荧光素酶的活性值分析结果 | 第51-52页 |
·实时荧光定量PCR检测TRβ△和TRβ1 mRNA不同组织中的表达水平 | 第52-55页 |
·讨论 | 第55-65页 |
·前体mRNA可变剪接分析 | 第55-57页 |
·构建重组质粒 | 第57页 |
·突变重组质粒 | 第57-59页 |
·体外转染实验 | 第59-60页 |
·荧光实时定量PCR | 第60-64页 |
·TRβ△表达的空间差异 | 第64-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
二、一个新的在垂体中特异表达的TRβ同工体的发现 | 第66-94页 |
·对象(材料)和方法 | 第66-76页 |
·大鼠TRβ2ΔcDNA克隆、表达及产物的纯化 | 第67-71页 |
·重组TRβ2△活性鉴定 | 第71-76页 |
·结果 | 第76-87页 |
·大鼠垂体组织总RNA的提取 | 第76页 |
·RT-PCR检测大鼠垂体组织中是否存在加长型TRβ2同工体 | 第76-78页 |
·实时荧光定量PCR检测大鼠垂体组织中的TRβ2△和TRβ2表达水平 | 第78-81页 |
·大鼠TRβ2ΔcDNA克隆表达及产物的纯化 | 第81-84页 |
·重组TRβ2△活性鉴定 | 第84-87页 |
·讨论 | 第87-93页 |
·关于大鼠垂体组织中TRβ2加长型同工体的发现 | 第87-88页 |
·大鼠垂体组织中TRβ2△基因表达水平 | 第88-89页 |
·大鼠TRβ2ΔcDNA克隆、表达及产物的纯化 | 第89-90页 |
·重组TRβ2△活性鉴定 | 第90-93页 |
·小结 | 第93-94页 |
三、核受体家族其他成员DBD区的初步研究 | 第94-101页 |
·对象和方法 | 第94-95页 |
·实验材料 | 第94页 |
·初步检测大鼠组织中VDR、AR、ER、GR中有无带着加长型DBD的同工体 | 第94-95页 |
·结果 | 第95-97页 |
·大鼠肝、肾、脑、垂体、骨骼肌、肺等组织总RNA的提取 | 第95-96页 |
·RT-PCR检测VDR、GR、AR、ER在大鼠不同组织中DBD的大小 | 第96-97页 |
·讨论 | 第97-100页 |
·小结 | 第100-101页 |
结论 | 第101-102页 |
论文创新点 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-110页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第110-112页 |
附录 | 第112-123页 |
综述 真核生物pre-mRNA选择性剪接的研究进展 | 第123-144页 |
综述参考文献 | 第138-144页 |
致谢 | 第144页 |