摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-16页 |
·马铃薯甲虫简介 | 第9-12页 |
·马铃薯甲虫的起源与扩散 | 第9-10页 |
·马铃薯甲虫的生物学特性 | 第10页 |
·马铃薯甲虫的危害 | 第10-11页 |
·温度对马铃薯甲虫的影响 | 第11-12页 |
·热激蛋白简介 | 第12-14页 |
·热激蛋白的发展历史 | 第12页 |
·热激蛋白的分类 | 第12页 |
·热激蛋白的生物学功能 | 第12-14页 |
·热激蛋白的研究意义 | 第14-15页 |
·本研究目的及意义 | 第15-16页 |
第二章 马铃薯甲虫热激蛋白hsp60、hsp70和hsp90全长cDNA的克隆及序列分析 | 第16-56页 |
·材料与方法 | 第16-28页 |
·供试虫源 | 第16页 |
·主要试剂与仪器设备 | 第16-17页 |
·技术路线 | 第17页 |
·总RNA的提取 | 第17-18页 |
·cDNA第一链的合成 | 第18-19页 |
·马铃薯甲虫hsp60、hsp70和hsp90cDNA片段的筛选 | 第19页 |
·RT-PCR扩增反应 | 第19-21页 |
·3’RACE扩增反应 | 第21-25页 |
·PCR产物的回收纯化及克隆测序 | 第25-27页 |
·序列的生物信息学分析 | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-53页 |
·马铃薯甲虫hsp60、hsp70和hsp90cDNA片段的筛选 | 第28-31页 |
·马铃薯甲虫hsp60全长cDNA序列的克隆 | 第31-33页 |
·马铃薯甲虫hsp70a、hsp70b和hsp70c全长cDNA序列的克隆 | 第33-38页 |
·马铃薯甲虫hsp90c全长cDNA序列的克隆 | 第38-40页 |
·序列的生物信息学分析 | 第40-53页 |
·讨论 | 第53-56页 |
第三章 马铃薯甲虫hsp60和hsp90mRNA表达水平的定量 | 第56-68页 |
·材料与方法 | 第56-58页 |
·供试昆虫处理 | 第56页 |
·主要试剂与仪器 | 第56页 |
·总RNA提取及第一链cDNA的合成 | 第56-58页 |
·内参基因的筛选及引物设计 | 第58页 |
·成虫体内hsp60和hsp90相对表达定量的检测 | 第58页 |
·数据处理 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-66页 |
·内参基因的筛选 | 第58-62页 |
·温度胁迫下成虫体内hsp60和hsp90的相对定量 | 第62-66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
第四章 全文结论 | 第68-70页 |
·Ld-hsp60的克隆与序列分析 | 第68页 |
·Ld-hsp70a、Ld-hsp70b和Ld-hsp70c的克隆与序列分析 | 第68-69页 |
·Ld-hsp90的克隆与序列分析 | 第69页 |
·Ld-hsp60和Ld-hsp90mRNA水平上的相对定量 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
致谢 | 第76-78页 |
作者简介 | 第78页 |