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前列腺素合成酶在肾及胃分布的探讨

【中医养生论文】作者:沈瑞莲 张国镜 金洁 王伟 邢安凤 周秀艳【摘要】 前列腺素合成酶是人体内重要的酶系,对其的研究目的旨在为临床医学、病理学提供形态学参考依据。
【关键词】 前列腺素合成酶; 分布; 平均灰度值
 前列腺素合成酶是与膜结合的多酶体系,催化、氧化、环化、还原作用一系列反应,前列腺素是由花生四烯酸衍生而成的。在组织切片上显示前列腺素合成酶的原理是该酶可催化底物花生四烯酸氧化成前列腺素,反应中所形成的活泼氧原子又使3.3-二氨基联苯胶形成棕色沉淀,以间接证实前列腺素合成酶的存在。
1 材料与方法
正常Wistar大鼠和昆明小鼠,体重分别为200g和20g左右,取其胃和肾,冰冻切片。用Janszen显示法。花生四烯酸0.4mg,DAB 2mg, KCN 0.65mg,0.2MTrisHCI缓冲液(pH8.0 ) 10ml,35℃孵育3小时,孵育后标本用蒸馏水洗,分别用甘油明胶和中性树胶封片。经LeicaQ50 OMC图像分析仪进行平均灰度值( Mean.Crey.MG)的测定,用于进行酶组织化学反应强度分析。
  2 结果
前列腺素合成酶反应产物为棕色颗粒,在大、小鼠的反应部位基本相同。在小鼠肾脏,肾皮质深层靠近髓质阳性反应产物,主要以近端小管曲部为主。在小鼠胃黏膜的近黏膜下层有阳性反应产物。在大鼠肾和胃也获相同结果。经图像分析仪测量每种组织切片5张,共测50视野。每种组织在不同封固条件下各测定一张盖玻片下无切片,但有封固剂的区域为空白对照。按肾、胃的顺序,而以明胶在前,树胶在后的排序测量,所获平均灰度值如下:小鼠222.91±9236.33±18.14209.42±7.50227.96±13.36大鼠217.42±6.0622701±11231.11±12.87225.83±10.15
3 讨论
通过对大、小鼠肾脏前列腺素合成酶组织化学反应的观察发现,阳性反应的部位基本相同,均位于皮质深层三分之二区域,而皮质浅层三分之一处基本无反应。说明在大、小鼠
 
 
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