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爪蟾卵母细胞固醇调控通路的建立及姜黄素的作用
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【药学论文网】作者:沃立科 范春雷 沃兴德【摘要】 [目的]在爪蟾卵母细胞中建立人类SCAP/SREBP固醇调控系统,利用此系统 研究 姜黄素对SCAP/SREBP调控通路的作用。[ 方法 ]构建带有绿色荧光报告蛋白基因的PLXRN4SREfpa质粒,将构建质粒和其他几种质粒分别提取混和成实验组质粒和对照组质粒,通过微注射的方法分别共注射到Ⅴ、Ⅵ爪蟾卵母细胞核内,与不同浓度的姜黄素共孵育3天,使用荧光定量PCR检测荧光表达量。[结果]相同浓度的姜黄素对注射含有固醇调节元件质粒的卵母细胞荧光表达量要明显高于不含相应元件的质粒。[结论]构建的质粒pLXRN4SREfPA能在爪蟾卵母细胞中有效地应答SCAP、SREBP调控因子;通过 影响 SCAP/SREBP调控通路调节SRE1下游基因的表达可能是姜黄素调脂作用的机理之一;利用核内共注射的方法在爪蟾卵母细胞中建立的SCAP/SREBP调控系统可作为SCAP配体类药物快速筛选和作用机制研究的细胞模型。 【关键词】 爪蟾卵母细胞 姜黄素 SCAP/SREBP固醇调控通路 Abstract: [Aim] The expressed system of sterol regulation by SCAP/SREBP Pathway was established in the oocyte of the Xenopus laevis and was applied to investigate the effect of cucurmin on the SREBP pathway.[Methods] The plasmid of PLXRN4SREfpa was restructed and injected into the nucleus of Xenopus Oocytes in phase V or VI. The oocyte was incubated with different concentrations of the curcumin. After three d
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