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美花石斛RAPD-PCR反应体系的建立
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【主管药师论文】作者：白音，包英华，王文全, 阙生全，谭庆辉【关键词】 美花石斛；,,基因组DNA；,,RAPD-PCR反应体系摘要：目的建立美花石斛基因组DNA 的RAPD-PCR最佳反应体系。 方法 在提取纯化美花石斛基因组DNA的基础上，利用PCR扩增技术和方法，对Mg2+，dNTP，模板DNA，引物，Taq聚合酶等反应条件进行优化。结果反应体系的最佳条件是总体积为25 μl，其中Mg2+ 浓度1.2 mmol・L-1，Taq聚合酶1.2U，引物浓度0.3 mmol・L-1，模板DNA 46 ng和dNTPs 160 mmol・L-1；PCR扩增程序为94℃预变性3 min，94℃变性50 s，40℃退火1 min，72℃延伸2 min，循环40次，72℃延伸5 min。结论该反应体系具有 经济 ，简便以及扩增条带较清晰而稳定等特点。
关键词：美花石斛； 基因组DNA； RAPD-PCR反应体系
Abstract:ObjectiveTo establish the best reaction condition of RAPD-PCR amplification system of Dendrobium loddigesii. MethodsSome reaction condition was optimized by amplifying technology and method of PCR based on isolating genomic DNA from D. loddigesii. Results The best amplification system for D. loddigesii was as follows: total reaction volume 25 μl, including 1.2 mmol・L-1 Mg2+，1.2 unite Taq polymerase, 0.3 mmol・L-1 random primer, 46
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