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无血清培养基与完全培养基体外诱导扩增 CIK细胞分泌细胞因子水平的比较
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【西药学论文下载】【摘要】 目的 比较无血清培养基(AIMV)与完全培养基(CM)体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。 方法 分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFNγ、IL2、IL1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞,比较细胞的增殖能力、细胞表型及分泌细胞因子水平。结果 与完全培养基比较,无血清培养基培养的CIK细胞增殖高峰较晚(14~17天),但增殖倍数高,在细胞表型、分泌细胞因子水平方面两种培养基培养的CIK细胞均无明显的差别(P>0.05)。结论 无血清培养基可代替完全培养基。 【关键词】 无血清培养基 免疫 细胞培养 细胞因子 肿瘤 0 引言 CIK细胞(Cytokineinduced killer,CIK)是将人外周血单个核细胞,在体外用多种细胞因子(如IFNγ、IL2、IL1及OKT3等)共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。具有极强的增殖能力及杀伤肿瘤细胞的能力。Critzapis等[1]报道,CIK细胞分泌多种细胞因子进一步提高免疫效应细胞的细胞毒作用从而杀伤肿瘤细胞。 治疗 所需的CIK细胞在体外培养时所用的条件对细胞的活性有很大 影响 。现在常用于细胞培养的完全培养基,因含有人AB血清,虽经HBV、HCV及HIV的检测,但仍有可能传播其他疾病,安全性低;并且存在批次差异、不宜质控,质量不能保证。无血清培养基则可达到生物洁净要求,成分明确,质量稳定,便于质控,克服了人AB血清的缺点,能减少病人意外感染的机会,对于免疫治疗的推广 应用 有重要意义。为此,我们比较了无血清培养基(AIMV)与完全培养基(含10%胎牛血清RPMI 1640)培养CIK细胞分泌细胞因子水平。 1 材料与方法 1.1 材料 健康足月产胎儿脐带静脉血50ml(枸橼酸钠抗凝),产妇各项生化指标检测正常。RPMI1640培养基、淋巴细胞分离液和无血清培养基购自GIBCO公司,细胞因子购自Bioscience公司, 流式试剂CD45FITC/CD4
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