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人血小板冻干前负载海藻糖技术的研究
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【西医学毕业小论文】作者：卢发强，刘景汉，欧阳锡林，李锡金，周俊，庄远【摘要】 为 研究 人血小板冻干前负载海藻糖技术与 方法 ，筛选出最佳负载海藻糖实验条件并进一步研究血小板在温度37℃条件下、 负载海藻糖4小时后的平均体积、体外激活程度和聚集反应性的变化，绘制血小板胞内海藻糖负载效率及浓度随温度、时间、胞外海藻糖浓度变化曲线，筛选合适的负载条件，分别以凝血酶、ADP、胶原、瑞斯托霉素4种物质作为血小板激活诱导剂，用血小板聚集仪分别检测血小板负载海藻糖前后的聚集反应性，用流式细胞仪检测 分析 血小板负载海藻糖前后其膜表面糖蛋白分子CD62p、PAC-1的表达率，加可逆性激活抑制剂PGE-1、腺苷后血小板激活被抑制的程度。结果表明：海藻糖负载效率与孵育时间（2小时后）、温度（30-40℃）呈良好线性关系，在37℃条件下经4小时孵育后负载效率可达60%，载入到胞内海藻糖浓度随胞外海藻糖浓度（＜50 mmol/L﹚的升高而递增；同负载前相比较，血小板平均体积（MPV）、血小板对4种激活诱导剂的最大聚集率均无显著性差别（P>0.01），经4小时负载海藻糖后血小板膜表面CD62p表达率升高，但联合添加可逆性激活抑制剂PGE-1、腺苷后CD62p表达率显著下降。结论： 37℃、4小时、胞外海藻糖浓度小于50 mmol/L为合适负载条件，添加可逆性血小板激活抑制剂后，冻干前负载海藻糖过程对血小板的体外激活和聚集活性没有显著 影响 。
【关键词】 海藻糖
Process of Human Platelets Loaded with Rehalose before Lyophili-zation
Abstract The aim of this research was to study the technology and methods of loading lyoprotectant-trehalose into cytoplasm of human platelets before lyophilization，to optimize
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