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微乳液相色谱法同时测定山楂叶提取物中4种黄酮成分
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【动物西医学毕业论文】作者:李宁 黄光亮 李玉兰 王铁杰 高崇凯【摘要】 建立了一种新的微乳体系,用于微乳液相色谱同时分析山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷、芦丁、牡荆素及金丝桃苷4种黄酮成分。通过对影响分离选择性的主要因素进行考察,得到最佳微乳体系的组成为: 1.0%(w/w) 聚氧乙烯月桂醇(Brij35)1.1%(w/w)正丁醇0.1%(w/w)正辛醇0.3%三乙胺(V/V)(H3PO4调节至pH 2.5)。在此微乳体系中,表面活性剂类型和浓度、油相种类、添加剂三乙胺、流动相的pH值对4种黄酮成分的分离起到了重要的作用。选择Venusil ASB C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),流速为0.8 mL/min,检测波长为360 nm,柱温为35 ℃。结果显示,4种黄酮成分在27 min内达到基线分离,在0.95~140.8 mg/L范围内,4个黄酮成分的线性相关系数r≥0.9995,平均回收率98.6%~101.6%。本方法可应用于山楂叶提取物中4种主要黄酮成分的质量分析。 【关键词】 微乳液相色谱, 山楂, 提取, 黄酮 1 引言 山楂叶为蔷薇科植物山里红(Crataegus pinnatifida Bge. Var. major N.E.Br.)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥叶。具有活血化瘀、理气通脉的功能。《中国药典》2005版[1]已收载山楂叶以及山楂叶提取物制剂——益心酮片。研究发现, 山楂叶中所含的黄酮类成分对心血管系统有明显的药理作用[2],主要含牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、芦丁、牡荆素、金丝桃苷等黄酮成分[3]。对山楂叶提取物中多种有效成分的主要分析方法有HPLC法[4,5]、梯度HPLC法[6,7]和毛细管电泳法[8]。由于山楂叶提取物中含有黄酮苷和苷元成分,它们的极性相差较大,用等强度洗脱保留时间较长,一般采用梯度洗脱才能在有效的时间内完成检测。微乳液相色谱(MELC)是一项液相色谱新技术。应用较多的是水包油型反相ME
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