致谢 | 第1-8页 |
内容提要 | 第8-9页 |
引言 | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-39页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第11-39页 |
一 发生历史 | 第11-12页 |
二 经济影响 | 第12页 |
三 病原 | 第12-17页 |
四 流行病学 | 第17-18页 |
五 临床症状 | 第18-19页 |
六 病理学 | 第19-21页 |
七 诊断 | 第21-25页 |
八 免疫学 | 第25-26页 |
九 防制 | 第26-27页 |
十 结语 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-39页 |
第二篇 研究内容 | 第39-95页 |
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗弱毒株的克隆与鉴定 | 第39-48页 |
摘要 | 第39-40页 |
一 材料与方法 | 第40-41页 |
1 毒株 | 第40页 |
2 细胞 | 第40页 |
3 PRRSV弱毒的培养 | 第40页 |
4 PRRSV弱毒的克隆 | 第40页 |
5 PRRSVMc TCID_(50)测定 | 第40页 |
6 电镜标本的制备 | 第40页 |
7 ELISA抗原的制备 | 第40-41页 |
8 参考血清 | 第41页 |
9 ELISA试验 | 第41页 |
二 结果 | 第41-44页 |
1 PRRSV培养结果 | 第41页 |
2 PRRSV的克隆与纯化 | 第41-44页 |
3 PRRSVMc电镜形态结构 | 第44页 |
4 ELISA试验鉴定 | 第44页 |
三 讨论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
英文摘要 | 第47-48页 |
第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒基质膜蛋白和核衣壳蛋白基因的克隆与鉴定 | 第48-60页 |
摘要 | 第48-49页 |
一 材料与方法 | 第49-52页 |
1 毒株来源 | 第49页 |
2 PCR引物的设计与合成 | 第49页 |
3 PRRSVMc的提纯和RNA的制备 | 第49页 |
4 反转录(RT) | 第49-50页 |
5 PCR反应 | 第50页 |
6 PCR产物凝胶电泳 | 第50页 |
7 PRRSVMc MN基因的克隆 | 第50-51页 |
8 MN基因的亚克隆 | 第51-52页 |
9 部分序列测定鉴定 | 第52页 |
二 结果 | 第52-54页 |
1 PCR扩增产物及其重组质粒的初步鉴定 | 第52-53页 |
2 PRRSVMc MN基因的部分序列 | 第53-54页 |
三 讨论 | 第54-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
英文摘要 | 第59-60页 |
第四章 猪繁殖与呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因序列分析 | 第60-79页 |
摘要 | 第60-61页 |
一 材料与方法 | 第61-63页 |
1 毒株来源 | 第61页 |
2 引物的设计与合成 | 第61页 |
3 病毒提纯及RNA的制备 | 第61页 |
4 PBVMN表达载体的构建 | 第61页 |
5 PBSMN重组质粒的构建 | 第61页 |
6 PBSMN MN基因序列分析 | 第61-63页 |
二 结果 | 第63-73页 |
1 MN蛋白基因的扩增与克隆 | 第63-64页 |
2 PRRSVMc MN基因序列测定结果 | 第64-66页 |
3 PRRSVMc MN基因与其它毒株MN基因序列比较 | 第66-70页 |
4 PRRSVMc MN基因推导的氨基酸序列与PRRSV美洲毒株和欧洲毒株的比较 | 第70-71页 |
5 PRRSVMc MN基因酶切位点分析 | 第71-73页 |
三 讨论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
英文摘要 | 第78-79页 |
第五章 猪繁殖与呼吸综合征病毒膜蛋白和核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第79-89页 |
摘要 | 第79页 |
一 材料与方法 | 第79-82页 |
1 病毒和细胞 | 第79页 |
2 载体和宿主菌 | 第79页 |
3 酶及化学试剂 | 第79-80页 |
4 引物的设计与合成 | 第80页 |
5 病毒的培养和RNA的制备 | 第80页 |
6 PRRSV高免血清的制备 | 第80页 |
7 PBVMN表达质粒的构建 | 第80-81页 |
8 MN蛋白的表达及鉴定 | 第81-82页 |
二 结果 | 第82-84页 |
1 RT-PCR扩增产物及其重组质粒鉴定 | 第82-84页 |
2 SDS-PAGE和免疫印迹 | 第84页 |
三 讨论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-88页 |
英文摘要 | 第88-89页 |
第六章 应用RT-PCR直接检测流产胎儿组织中猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第89-95页 |
摘要 | 第89页 |
一 材料与方法 | 第89-91页 |
1 病毒样品制备 | 第89-90页 |
2 RNA制备 | 第90页 |
3 引物设计 | 第90页 |
4 反转录(RT) | 第90-91页 |
5 PCR反应 | 第91页 |
6 病毒分离鉴定 | 第91页 |
二 结果 | 第91-92页 |
三 讨论 | 第92页 |
参考文献 | 第92-94页 |
英文摘要 | 第94-95页 |
结语 | 第95页 |